2018-02-01
以芽孢桿菌進行細菌病原菌對峙試驗-2
- 目前芋頭軟腐病已知是由兩種細菌所造成，分別為Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc)和Pectobacterium chrysanthemi (Pch)，本次實驗以芽孢桿菌YM-BM01、YM-BA01、YM-BS01、YM-BC01和YM-BP01與從得病芋頭中篩出兩種病原細菌(未鑑定)進行對峙試驗。
-
材料與方法:
1. 試驗前準備(細菌病原菌增量):
配製液態LB培養基，將細菌病原菌培養一天。
2.配置固態LA培養基，經高溫高壓滅菌後(1.5atm、121℃、20min)，放置於50℃水浴槽中，防止培養基凝固。
3.將未凝固固態LA培養基與細菌病原菌均勻混合(菌液:LA培養基=0.6:15)，以每盤15ml倒入培養皿中，等待凝固。
4.培養基凝固後，以6mm鑽孔器在培養基上打7個洞，每一洞注入30µL芽孢桿菌菌液(已稀釋)，三重複(共60盤)，30℃ ，培養1天。
.PNG)
- 使用菌種:
菌種 原始菌量(CFU/mL) YM-BM01 2.5E+08 YM-BA01 1.8E+11 YM-BS01 5.0E+11 YM-BC01 1.0E+14 YM-BP-01 1.0E+12 軟腐-1(偏透明) 2.6E+10 軟腐-2(偏黃) 4.0E+09 -
芽孢桿菌與病原菌菌量 :
稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 病原菌 原始濃度 25X 250X 2500X
軟腐-1(偏透明) 2..62E+10 1.0E+09 1.0E+08 1.0E+07 軟腐-2(偏黃) 4.03E+09 1.6E+08 1.6E+07 1.6E+06
稀釋倍數 菌種 原液 10x 100X 1000X YM-BM01 2.5E+08 2.5E+07 2.5E+06 2.5E+05
YM-BA01 1.8E+11 1.8E+10 1.8E+09 1.8E+08 YM-BS01 5.5E+11
5.0E+10 5.0E+09 5.0E+08 YM-BC01 1.0E+14 1.0E+13 1.0E+12 1.0E+11 YM-BP01 1.0E+12 1.0E+11 1.0E+10 1.0E+09 -
YM-BM01與軟腐-1，軟腐-2對峙試驗結果
1.YM-BM01對於軟腐病無抑制效果(沒有明顯抑制圈)
軟腐病-1(偏透明)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.0E+09) 250X(1.0E+08) 2500X(1.0E+07) CK - - - YM-BM01 原液 - - - 10X - - - 100X - - - 1000X - - -
2.YM-BM01對於軟腐病無抑制效果(沒有明顯抑制圈)
軟腐病-2(偏黃)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.6E+08) 250X(1.6E+07) 2500X(1.6E+06) CK - - - YM-BM01 原液 - - - 10X - - - 100X - - - 1000X - - - -
YM-BA01與軟腐-1，軟腐-2對峙試驗結果
1.YM-BA01對軟腐-1無抑制效果(沒有明顯的抑制圈)
.PNG)
軟腐病-1(偏透明)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.0E+09) 250X(1.0E+08) 2500X(1.0E+07) CK - - - YM-BA01 原液 - - - 10X - - - 100X - - - 1000X - - - 2.YM-BA01對於軟腐-2有抑制效果。當軟腐-2連續稀釋時(25X至2500X)，原液與10X稀釋至YM-BA01菌液對軟腐-2產生抑制圈。
軟腐病-2(偏黃)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.6E+08) 250X(1.6E+07) 2500X(1.6E+06) CK - - - YM-BA01 原液 + ++ ++ 10X - + + 100X - - - 1000X - - - - YM-BS01與軟腐-1，軟腐-2對峙試驗結果
1.YM-BS01對軟腐-1有抑制效果。當軟腐-1連續稀釋時(25X至2500X)，原液BS菌液對軟腐-1產生小抑制圈，但隨著軟腐-1菌量下降，其液制圈無隨之變大。
軟腐病-1(偏透明)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.0E+09) 250X(1.0E+08) 2500X(1.0E+07) CK - - - YM-BS01 原液 + + + 10X - - - 100X - - - 1000X - - -
2.YM-BS01對於軟腐-2有抑制效果。當軟腐-2連續稀釋時(25X至2500X)，原液，10X稀釋，100X稀釋之YM-BS01菌液可對軟腐-2產生抑制圈。
軟腐病-2(偏黃)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.6E+08) 250X(1.6E+07) 2500X(1.6E+06) CK - - - YM-BS01 原液 +++ +++ ++ 10X ++ ++ ++ 100X - - - 1000X - - - - YM-BC01與軟腐-1，軟腐-2對峙試驗結果
1.YM-BC01對軟腐-1無抑制效果(沒有明顯抑制圈)
軟腐病-1(偏透明)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.0E+09) 250X(1.0E+08) 2500X(1.0E+07) CK - - - YM-BC01 原液 - - - 10X - - - 100X - - - 1000X - - -
2.YM-BC01對軟腐-2無抑制效果(沒有明顯抑制圈)
.PNG)
軟腐病-2(偏黃)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.6E+08) 250X(1.6E+07) 2500X(1.6E+06) CK - - - YM-BC01 原液 - - - 10X - - - 100X - - - 1000X - - - - YM-BP01與軟腐-1，軟腐-2對峙試驗結果
1.YM-BP01對軟腐-1無抑制效果(沒有明顯的抑制圈)
軟腐病-1(偏透明)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.0E+09) 250X(1.0E+08) 2500X(1.0E+07) CK - - - YM-BP01 原液 - - - 10X - - - 100X - - - 1000X - - -
2.YM-BP01對軟腐-2無抑制效果(沒有明顯的抑制圈)
軟腐病-2(偏黃)稀釋倍數之菌量(CFU/mL) 25x(1.6E+08) 250X(1.6E+07) 2500X(1.6E+06) CK - - - YM-BP01 原液 - - - 10X - - - 100X - - - 1000X - - -